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(一)適用范圍
監測消毒液(含氯消毒液、碘制劑、過(guò)氧乙酸、戊二醛等)的有效濃度和染菌量情況。
(二)監測時(shí)機
新配制(購進(jìn))的消毒液或使用中的消毒液。
(三)基本方法
1、化學(xué)指示法:使用試紙測試消毒液的濃度。
2、瓊脂傾注法:實(shí)驗室檢測消毒液的染菌量。
(四)基本試劑
1、對于醇類(lèi)與酚類(lèi)消毒劑,稀釋液用普通營(yíng)養肉湯即可;
2、對于含氯消毒劑、含碘消毒劑、過(guò)氧化物消毒劑,需在肉湯中加入硫代硫酸鈉;
3、對于洗必泰、季銨鹽類(lèi)消毒劑,需在肉湯中加入3%(W/V)吐溫80和卵磷脂;
4、對于醛類(lèi)消毒劑,需在肉湯中加入甘氨酸;
5、對于含有表面活性劑的各種復方消毒劑,需在肉湯中加入3%(W/V)吐溫80,以中和被檢樣液的殘效作用。
(五)操作步驟
1、濃度的監測
1)根據消毒劑的種類(lèi),選擇相應的濃度測試紙條。若檢測戊二醛濃度可選擇戊二醛測試卡;檢測含氯制劑和過(guò)氧乙酸采用G-1型消毒液濃度試紙。
2)結果按試紙條說(shuō)明操作并判斷結果。
2、染菌量的監測
1)用無(wú)菌移液管吸取使用中消毒液,加入含相應中和劑的緩沖液中,充分混勻,作用約10min.
2)再用無(wú)菌吸管分別吸取上述的待檢樣本,置于2個(gè)直徑為90mm的滅菌平皿內。
3)加入已熔化的45~48℃的營(yíng)養瓊脂16~18ml,邊傾注邊搖勻,待瓊脂凝固。
4)其中一個(gè)平板置于(25±1)℃溫箱培養7日,觀(guān)察霉菌生長(cháng)情況;另一個(gè)平板置于(36±1)℃溫箱培養72h,記數菌落數,必要時(shí)做致病菌(金黃色葡萄球菌、乙型溶血性鏈球菌等)的檢測。
5)計算公式:
消毒液染菌量(cfu/m1)=每個(gè)平板上的菌落數×10
3、細菌種類(lèi)鑒定
1)從營(yíng)養瓊脂中挑取可疑菌落,根據實(shí)際情況可選擇血平板、中國藍平板、雙S平板、麥康凱平板或各種商用快速篩選平板進(jìn)行細菌接種。
2)接種后將平板置于(36±1)℃溫箱培養24~48h,挑取可疑菌落進(jìn)行微生物學(xué)鑒定,必要時(shí)做藥敏或分子生物學(xué)分型。
(六)注意事項
1、正確選擇試紙條進(jìn)行檢測,并注意作用時(shí)間、溫度對結果的影響。
2、消毒液染菌量結果應≤100cfu/ml,不得檢出致病菌。
3、必須選擇含相應中和劑的稀釋液進(jìn)行采樣,稀釋液與消毒液作用時(shí)間不少于10min。
4、傾注時(shí)瓊脂溫度保持在45~48℃,溫度過(guò)高可致細菌死亡,過(guò)低則影響傾注效果。
5、含碘消毒劑目前無(wú)濃度檢測試紙(卡),不能常規檢測。
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